Strumento di sequecing Sanger

Il sequenziamento di Sanger, che è stato utilizzato per il sequenziamento dei nucleotidi del DNA, è stato creato e premiato il premio Nobel da Federico Sanger nel 1977.
Come funziona il sequenziamento di Sanger?
In primo luogo, usiamo il primer per avere un breve primer vincolante accanto alla regione di interesse sul modello DNA. Quindi, la DNA polimerasi inizia a costruire dal primer aggiungendo nucleotidi complementari al filamento di DNA.
Per trovare la fermata che ci consente di identificare la base della fine del particolare frammento di DNA. Il principio di sequenziamento di Sanger viene applicato per rimuovere un atomo di ossigeno dal ribonucleotide. DDNTP (Dideossynucleotide) è mettere una chiave in una marcia. L'enzima polimerasi non aggiungerà più nucleotidi normali a questa catena di DNA. L'estensione si fermerebbe.
Siamo in grado di identificare il nucleotide di terminazione a catena mediante un colorante fluorescente specifico. L'analizzatore genetico Superyears può supportare la tintura fluorescente fino a 6/8 di colori per l'esattezza.
Il sequenziamento di Sanger provoca la formazione di prodotti di estensione di varie lunghezze terminate con dideossinucleotidi all'estremità 3 '.
L'elettroforesi capillare separa i prodotti di estensione.
Una corrente elettrica inietta le molecole in un lungo tubo capillare riempito con un polimero in gel.
Durante la CE (elettroforesi capillare), i frammenti di DNA caricati negativamente si spostano verso l'elettrodo positivo.
La velocità con cui un frammento di DNA migra attraverso il mezzo è inversamente proporzionale al suo peso molecolare.
Questo processo può separare i prodotti di estensione per dimensione a una risoluzione di una base.
Un laser eccita i frammenti di DNA marcati con la tintura mentre attraversano una finestra minuscola all'estremità del capillare.
La tintura eccitata emette luce a una lunghezza d'onda caratteristica che viene rilevata da un sensore di luce.
Il software può interpretare il segnale rilevato e tradurlo in una base.
Una reazione di sequenziamento viene eseguita in presenza di tutti e quattro i nucleotidi terminati, un pool di frammenti di DNA che vengono misurati e separati da base per base.
File di dati che mostra la sequenza del DNA in un elettroferogramma colorato.

Sulla base del principio di sequenziamento di Sanger, l'analizzatore genico prodotto dal gene Superyears può essere utilizzato per l'analisi della sequenza genica e l'analisi dei frammenti, che può rilevare rapidamente geni multi-target (10-70 loci) alla volta. Il gen Etic Analyzer ha i vantaggi di bassi costi di rilevamento singolo, funzionamento semplice e interpretazione intuitiva e diretta. È uno strumento potente per l'ispezione delle articolazioni a media throughput e multi-gen.

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